93年前，時任紅一方面軍第一軍團第三軍軍長的黃公略在江西省吉安市青原區(qū)東固畬族鄉(xiāng)六渡坳指揮部隊轉移時，遭敵機襲擊壯烈犧牲。近年，疑似黃公略烈士遺骸在江西省吉安市青原區(qū)東固畬族鄉(xiāng)出土。復旦大學科技考古研究院文少卿團隊在經(jīng)歷7個多月的DNA鑒定后，最終確認其為黃公略烈士遺骸。9月25日，黃公略烈士遺骸在江西省吉安市東固革命烈士陵園安葬。
這項艱巨的鑒定工作始于2年前?！霸贒NA技術鑒定中，一般從顳骨與牙齒提取DNA，我們拿到的樣本并不是質量最好的檢材。更麻煩的是，遺骸的出土地點在江西，當?shù)赝寥朗撬嵝约t壤，導致樣本保存質量不夠好?！蔽纳偾浣榻B道。
圖片由復旦大學提供。
根據(jù)質量評估，疑似黃公略樣本的全基因組測序文庫中，人源內源性極低，人的DNA含量僅為總DNA含量的千分之一到千分之二左右，提取的DNA片段長度只有約80bp，且存在末端損傷，說明樣本埋藏有一定年代、保存狀況不佳。
于是，文少卿團隊決定采用Y染色體譜系鑒定的方法，即將Y染色體多重PCR應用于黃公略疑似樣本及與黃公略屬于同一父系的親屬，確定其是否來自相同Y染色體單倍群。如果是，使用Y染色體全序探針捕獲測序對現(xiàn)生黃公略父系家屬進行Y染色體測序，結合復旦Y全序數(shù)據(jù)庫和ISOGG數(shù)據(jù)庫等，獲得Y染色體下游罕見突變?；谶@些位點設計Y染色體捕獲探針，對黃公略疑似樣本進行捕獲測序，確定其是否攜帶這些下游罕見突變，判斷是否屬于同一晚近父系家族。
經(jīng)鑒定Y染色體多重PCR檢測結果顯示，疑似黃公略樣本與黃公略的父系親屬同屬于Y染色體單倍群O2a1b1a1a1a1-F325。統(tǒng)計復旦Y染色體精細分型數(shù)據(jù)庫（涵蓋20000條數(shù)據(jù)）中O2a1b1a1a1a1-F325的人群頻率為9.5%，求得隨機匹配概率為0.9025%，非父排除率為99.0975%。隨后，團隊對樣本進行Y染色體捕獲驗證，發(fā)現(xiàn)疑似黃公略樣本與黃公略同一父系家屬共享所有檢出的罕見突變，非父排除率大于99.999%，疑似黃公略樣本與黃公略現(xiàn)生父系親屬屬于同一晚近父系家族。
為保證結果的準確性，研究團隊做了進一步的復雜親緣關系鑒定。通過對疑似樣本與黃公略二級親屬的全基因組文庫進行1240K探針雜交捕獲測序，驗證兩者是否存在二級親緣關系。
這套1240K捕獲方案包含了1233013個SNP位點，被廣泛應用于人類古DNA起源遷徙、人群混合、親緣關系等研究。通過對全基因組水平成功捕獲的123466個SNP位點進行分析，確認黃公略疑似樣本與黃公略外孫張忠為二級親緣關系。
歷時七個多月，通過Y染色體譜系鑒定和復雜親緣關系鑒定疊加，團隊終于將鑒定結果提升至法庭效力水平。
據(jù)悉，文少卿團隊一直致力于用科技考古手段為烈士尋親。近9年來，他們從呂梁戰(zhàn)役、滇西保衛(wèi)戰(zhàn)、長沙會戰(zhàn)、平遙遭遇戰(zhàn)、高臺戰(zhàn)役、淮海戰(zhàn)役等烈士遺骸中，已累計收集了1千多位無名烈士的DNA樣本，有望助力更多像黃公略一樣的革命英雄回家。
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